Để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà cần dùng đến những loại môi trường nuôi cấy vi khuẩn nào?

Nội dung chính

• Để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà cần dùng đến những loại môi trường nuôi cấy vi khuẩn nào?
• Các loại môi trường dùng để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà có thành phần điều chế như thế nào?
• Mẫu bệnh phẩm dùng để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà cần được cấy trên môi trường nuôi cấy vi khuẩn vào thời gian sau khi lấy mẫu?

Để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà cần dùng đến những loại môi trường nuôi cấy vi khuẩn nào?

Theo Mục 3 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-39:2016 về Bệnh động vật - Quy trình chẩn đoán - Phần 39: Bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà quy định về thuốc thử và vật liệu thử dùng cho việc chẩn đoán bệnh như sau:

Thuốc thử và vật liệu thử

Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích; sử dụng nước cất hoặc nước đã khử khoáng hoặc nước có độ tinh khiết tương đương không có Rnase, trừ các trường hợp có quy định khác.

3.1 Môi trường nước Frey (Phụ lục A)

3.2 Môi trường thạch Frey (Phụ lục A), là môi trường nước Frey có bổ sung 1 % thạch.

3.3 Huyết thanh bổ sung, bổ sung 5 % huyết thanh thai bê hoặc huyết thanh ngựa hoặc huyết thanh lợn vô trùng đã được bất hoạt ở 56°C trong 30 min.

3.4 Nguyên liệu cho PCR (Phụ lục B)

3.5 Bông cồn, bông cot-ton đã được tẩm cồn 70 %

3.6 Tăm bông vô trùng, có cán mảnh, đàn hồi, dài khoảng 20 cm, một đầu quấn bông thật chắc, to hơn hạt gạo đã được vô trùng.

3.7 Xi-lanh

Theo đó, để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà cần dùng đến môi trường nước frey và môi trường thạch frey.

Bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà (Hình từ Internet)

Các loại môi trường dùng để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà có thành phần điều chế như thế nào?

Theo Phụ lục A Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-39:2016 về Bệnh động vật - Quy trình chẩn đoán - Phần 39: Bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà quy định về môi trường nuôi cấy cho vi khuẩn Mycoplasma gallisepticum gây bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà như sau:

Môi trường nuôi cấy cho vi khuẩn Mycoplasma gallisepticum

A.1 Môi trường nước Frey

Pha chế môi trường nước Frey gồm 2 dung dịch thành phần:

Dung dịch A:

Môi trường PPLO (không có crystal violet) 14,7 g

Nước 700 ml

Hòa tan môi trường PPLO trong nước.

Vô trùng bằng nồi hấp (4.3) ở 121°C trong 15 min.

Dung dịch B:

Huyết thanh lợn (hoặc huyết thanh ngựa) 150 ml

Cao nấm men 25 % 100 ml

Dung dịch đường glucose 10 % 10 ml

Thallous acetate 10 ml

Penicilin G 2000 UI 5 ml

Đỏ phenol 0,1 % 20 ml

Hòa các dung dịch trên với nhau.

Điều chỉnh pH dung dịch B = 7,8 - 8,0 (bằng dung dịch NaOH 0,1 M).

Vô trùng dung dịch B bằng màng lọc (4.9).

Môi trường nước Frey:

Dung dịch A đã vô trùng và để nguội khoảng 40°C đến 50°C sẽ được bổ sung với dung dịch B vô trùng.

Chia ra các ống nghiệm vô trùng, khoảng 5 ml đến 10 ml môi trường / ống.

Bảo quản môi trường ở 4°C.

A.2 Môi trường thạch Frey

Pha chế môi trường thạch Frey, là môi trường nước Frey có bổ sung thạch (agar), gồm 2 dung dịch thành phần:

Dung dịch A:

Môi trường PPLO (không có crystal violet) 14,7 g

Thạch (agar) 10 g

Nước 700 ml

Hòa tan môi trường PPLO và thạch trong nước.

Vô trùng bằng nồi hấp (4.3) ở 121°C trong 15 min.

Dung dịch B:

Huyết thanh lợn (hoặc huyết thanh ngựa) 150 ml

Cao nấm men 25 % 100 ml

Thallous acetate 10 ml

Penicilin G 2000 UI 5 ml

Đỏ phenol 0,1 % 20 ml

Hòa các dung dịch trên với nhau.

Điều chỉnh pH dung dịch B = 7,8 - 8,0 (bằng dung dịch NaOH 0,1 M).

Vô trùng dung dịch B bằng màng lọc (4.9).

Môi trường thạch Frey:

Dung dịch A đã vô trùng và để nguội khoảng 40°C đến 50°C sẽ được bổ sung với dung dịch B vô trùng.

Chia ra đĩa lồng vô trùng, khoảng 20 ml thạch / đĩa.

Bảo quản môi trường ở 4°C.

Như vậy, các loại môi trường nuôi cấy vi khuẩn Mycoplasma gallisepticum gây bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gầ có thành phần cấu tạo theo tiêu chuẩn nêu trên.

Mẫu bệnh phẩm dùng để chẩn đoán bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà cần được cấy trên môi trường nuôi cấy vi khuẩn vào thời gian sau khi lấy mẫu?

Theo tiểu mục 6.1 Mục 6 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8400-39:2016 về Bệnh động vật - Quy trình chẩn đoán - Phần 39: Bệnh viêm đường hô hấp mãn tính ở gà quy định về việc lấy mẫu bệnh phẩm như sau:

Chẩn đoán trong phòng thí nghiệm

6.1 Lấy mẫu

- Nếu gà còn sống: lấy mẫu là dịch ngoáy ở hốc mắt, hốc mũi, hầu họng, khí quản.

Sát trùng bên ngoài vị trí lấy mẫu bằng bông cồn (3.5), dùng tăm bông vô trùng (3.6) ngoáy vào từng vị trí lấy mẫu rồi cho vào môi trường nuôi cấy (3.1).

- Nếu gà đã chết: lấy mẫu là dịch ở hốc mắt, hốc mũi, hầu họng, khí quản, phổi, các túi khí, dịch khớp gối chân.

Bệnh phẩm là dịch ở hốc mắt, hốc mũi, hầu họng, khí quản, các túi khí, dịch ở khớp chân: sát trùng bên ngoài vị trí lấy mẫu bằng bông cồn (3.5), dùng tăm bông vô trùng (3.6) hoặc xi lanh vô trùng để hút dịch ở từng vị trí lấy mẫu rồi cho vào môi trường nuôi cấy (3.1).

Bệnh phẩm là các túi khí: dùng kéo (4.8) mở xoang ngực, xoang bụng của gà, dùng panh (4.8) gạt phủ tạng để bộc lộ rõ túi khí, dùng tăm bông vô trùng (3.6) ngoáy vào túi khí rồi cho vào môi trường nuôi cấy (3.1).

Bệnh phẩm là phổi: Lấy mẫu vô trùng từ 10 g đến 100 g, cho vào từng lọ hay túi vô trùng riêng biệt, đậy kín, ghi ký hiệu mẫu

Mẫu bệnh phẩm nên được nuôi cấy trên môi trường càng nhanh càng tốt. Trong trường hợp phải vận chuyển đến phòng thí nghiệm thì mẫu bệnh phẩm phải được đựng trong các ống mẫu đã có môi trường thích hợp cho nuôi cấy vi khuẩn M. gallisepticum (môi trường Frey, xem 3.1), đậy kín, bảo quản trong điều kiện lạnh từ 2°C đến 8°C và gửi về phòng thí nghiệm trong vòng 24 h sau khi lấy mẫu. Gửi kèm theo bệnh phẩm giấy yêu cầu xét nghiệm có ghi rõ triệu chứng, bệnh tích và đặc điểm dịch tễ.

...

Từ tiêu chuẩn trên thì không quy định rõ về thời gian nuôi cấy mẫu bệnh phẩm trên môi trường nhưng việc nuôi cấy phải thực hiện càng nhanh càng tốt sau khi đã lấy được mẫu bệnh phẩm.