Phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần sử dụng những thiết bị, dụng cụ nào?

Nội dung chính

• Phát hiện vi sinh vật Shigella spp là hoạt động gì?
• Phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần sử dụng những thiết bị, dụng cụ nào?
• Thực hiện phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần tuân thủ những quyên tắc nào?

Phát hiện vi sinh vật Shigella spp là hoạt động gì?

Shigella được quy định tại tiểu mục 3.1 Mục 3 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8131:2009 (ISO 21567 : 2004) về Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Phương pháp phát hiện Shigella Spp như sau:

Thuật ngữ và định nghĩa

Trong tiêu chuẩn này sử dụng các thuật ngữ và định nghĩa sau đây:

3.1. Shigella (shigella)

Các vi sinh vật tạo thành các khuẩn lạc phù hợp với các mô tả của các loài trên môi trường chọn lọc đặc được sử dụng, và cho thấy có các đặc tính sinh hóa vào huyết thanh học như mô tả trong phép thử được thực hiện theo tiêu chuẩn này.

3.2. Phát hiện Shigella spp. (detection of Shighella spp.)

Xác định sự có mặt hay không có mặt các vi sinh vật này trong một phần khối lượng cụ thể của mẫu thử khi các phép thử được tiến hành theo tiêu chuẩn này.

...

Theo đó, vi sinh vật Shigella là các vi sinh vật tạo thành các khuẩn lạc phù hợp với các mô tả của các loài trên môi trường chọn lọc đặc được sử dụng, và cho thấy có các đặc tính sinh hóa vào huyết thanh học như mô tả trong phép thử được thực hiện theo tiêu chuẩn này.

Phát hiện Shigella spp là việc xác định sự có mặt hay không có mặt các vi sinh vật này trong một phần khối lượng cụ thể của mẫu thử khi các phép thử được tiến hành theo tiêu chuẩn này.

Phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần sử dụng những thiết bị, dụng cụ nào? (Hình từ Internet)

Phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần sử dụng những thiết bị, dụng cụ nào?

Theo Mục 6 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8131:2009 (ISO 21567 : 2004) về Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Phương pháp phát hiện Shigella Spp, phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần sử dụng những thiết bị, dụng cụ sau đây:

Có thể dùng thiết bị, dụng cụ dùng một lần thay cho việc sử dụng lại các dụng cụ thủy tinh nếu chúng có các qui định kỹ thuật tương tự.

Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm phân tích vi sinh thông thường [xem TCVN 6404 (ISO 7218)] và cụ thể như sau:

- Thiết bị để khử trùng khô (tủ sấy) hoặc để khử trùng ướt (nồi hấp áp lực)

- Tủ sấy hoặc lò sấy, được thông gió đối lưu, có khả duy trì nhiệt độ ở 37 oC đến 55 oC.

- Tủ ấm, có khả duy trì nhiệt độ ở 37 oC ± 1 oC và 41,5 oC ± 1 oC.

- Bình có môi trường cải biến hoặc tủ cấy kỵ khí và các thiết bị liên quan để đạt được các điều kiện kỵ khí có thành phần khí như O2 < 1 % và CO2 từ 9 % đến 13 %. Xem TCVN 6404 (ISO 7218).

- Nồi cách thủy, có thể duy trì nhiệt độ ở 47 oC ± 3 oC để làm tan chảy môi trường trước khi đổ đĩa và một nồi cách thủy khác duy trì nhiệt độ ở 50 oC ± 1 oC (Xem B.6.3.2 và B.10.2.2).

- Bộ đồng hóa kiểu nhu động (dạng túi) hoặc máy trộn quay.

- Kim cấy và que cấy vòng, bằng platin/iridi hoặc niken/crom có đường kính khoảng 3 mm hoặc các kim cấy và que cấy vòng bằng chất dẻo sử dụng một lần có các yêu cầu thích hợp.

- Máy đo pH, chính xác hiệu chuẩn đến ± 0,1 đơn vị pH ở 25 oC.

- Bình cầu hoặc chai, có nắp đậy, có dung tích thích hợp cho việc chuẩn bị và bảo quản các canh thang tăng sinh và thạch.

- Ống đong

- Ống nghiệm, có đường kính khoảng 18 mm, dài 160 mm (có nút đậy hoặc nắp vặn), hoặc chai cấy có dung tích danh định 30 ml và 10 ml, có nắp đậy bằng kim loại không độc có lớp lót hoặc nắp đậy bằng chất dẻo dùng một lần.

- Đĩa Petri, có đường kính từ 90 mm đến 100 mm và loại khác có đường kính 140 mm.

- Phiến kính hoặc tấm kính, thích hợp cho các phép thử sự ngưng kết.

Thực hiện phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần tuân thủ những quyên tắc nào?

Theo Mục 4 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8131:2009 (ISO 21567 : 2004) về Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Phương pháp phát hiện Shigella Spp, thực hiện phương pháp phát hiện Shigella spp để xác định vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi cần tuân thủ những quyên tắc sau:

- Yêu cầu chung

Việc phát hiện Shigella cần đến bốn giai đoạn liên tiếp (xem Phụ lục A ban hành kèm theo Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 8131:2009 (ISO 21567 : 2004) về Vi sinh vật trong thực phẩm và thức ăn chăn nuôi - Phương pháp phát hiện Shigella Spp).

- Tăng sinh trong môi trường lỏng chọn lọc

Phần mẫu thử được cấy vào canh thang Shigella có chứa novobioxin 0,5 µg/ml, rồi được ủ kỵ khí ở 41,5 oC ± 1 oC trong 16 h đến 20 h.

- Đổ đĩa và nhận biết các khuẩn lạc

Cấy các dịch cấy tăng sinh thu được vào ba môi trường phân biệt chọn lọc: thạch MacConkey có tính chọn lọc thấp; thạch XLD có tính chọn lọc trung bình và thạch Hektoen có độ nhạy cao nhất. Tất cả các đĩa này được ủ ở 37 oC trong 20 h đến 24 h.

- Khẳng định bằng sinh hóa và huyết thanh học

Chọn các khuẩn lạc điển hình và nghi ngờ trong mỗi môi trường từ ba môi trường thạch chọn lọc. Các khuẩn lạc này được cấy thuần khiết trên thạch dinh dưỡng, rồi tiến hành các phép thử sinh hóa và huyết thanh học như mô tả.